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项目 噬菌体展示
服务内容 噬菌体展示
服务周期 100-120工作日
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噬菌体展示
原理：

噬菌体展示技术（phage displayed technology，PDT）是将外源蛋白或多肽与噬菌体外壳蛋白融合，展示在噬菌体表面并保持特定的空间构象，利用特异性亲和作用以筛选特异性蛋白或多肽的一项新技术。1985年Smith，G.P提出将外源基因插入改建过的噬菌体外壳蛋白基因，表达含有外源蛋白或多肽的融合蛋白，这种带有融合蛋白的噬菌体称为融合噬菌体。通过吸附-洗脱-扩增的重复过程，将含有能与靶蛋白特异结合的外源蛋白的噬菌体从表达各种外源蛋白的噬菌体库中筛选出来，然后进行富集、扩增及基因序列测定，推断外源蛋白的氨基酸组成。该技术将基因型与表型、分子结合活性与噬菌体的可扩增性结合在一起，是一种高效的筛选新技术。目前已成功应用于抗原表位分析，单抗筛选，蛋白质功能拮抗多肽或模拟多肽的确定等。在药物筛选、疫苗设计等方面发挥重要作用。 

 
实验流程：

1. 将小分子或交联后的小分子包板后，用封闭液进行封闭；

2. 噬菌体展示文库库进行3轮差减筛选，铺板，获得噬菌体阳性克隆；

3. 选取筛选得到的噬菌体克隆进行ELISA检测，选择ELISA检测亲和力较高的克隆（P/N＞3.0）进行测序；

4. 采用生物信息学分析测序获得的噬菌体阳性克隆；

5. 撰写详细的实验报告，交付实验结果。

 

 
相关要求(客户提供)：

1. 客户需要提供足够的兴趣蛋白或生物大分子(至少2mg，纯度90%以上)。

2. 客户需提供用于筛选的特殊组织噬菌体文库（滴度在1 x 108以上）


最终结果：

1. 酶联免疫吸附法鉴定的阳性噬菌体与小分子的结合活性； 

2. 挑取的噬菌体克隆测序结果；

3. 生物信息学分析测序结果；

4. 筛选得到的噬菌体克隆质粒；

5. 具体试验流程(包括：实验步骤；主要仪器及试剂说明(含仪器厂家、型号；试剂厂家、批号))；

6. 原始实验图片及数据。