服务与项目

服务与项目

您当前的位置:首页 > 服务与项目 > 表观遗传学 > 甲基化相关检测

项目 甲基化相关检测
服务内容 DNA甲基化水平检测
服务周期 25-35工作日
详情

DNA甲基化水平检测

原理:

DNA甲基化是表观遗传学的重要研究内容之一,它可以抑制基因的表达。甲基化通常发生在胞嘧啶的C5位,形成5-甲基胞嘧啶(5mC),甲基化的胞嘧啶多位于CpG岛上。甲基化特异性PCR (MSP)是一种检测基因组DNA甲基化水平的常用方法。该法是将DNA经亚硫酸氢钠处理,非甲基化的胞嘧啶转变为尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶保持不变。在PCR反应时,设计两套不同的引物对:一对引物序列针对经亚硫酸氢钠处理后的甲基化DNA链设计,若用该对引物能扩增出片段,说明该检测位点发生了甲基化;另一引物针对经亚硫酸氢钠处理后的非甲基化DNA链设计,若用该对引物能扩增出片段,说明该检测位点没有甲基化。两对引物都具有很高的特异性,与未经处理的DNA序列无互补配对。

 

实验流程:

1. 序列分析及MSP引物设计;

2. 基因组DNA抽提及体外甲基化处理;

3. MSP;

4. MSP产物测序。

 

相关要求(客户提供):

1. 客户提供待测基因准确信息序列或NCBI序列链接;

2. 客户提供甲基化修饰试剂盒。

 

最终结果:

1. MSP产物电泳图;

2. 具体实验流程(包括:实验步骤;主要仪器及试剂说明(含仪器厂家、型号;试剂厂家、批号));

3. 相关结果分析:

1) 甲基化分析,筛选差异甲基化位点;

2) 基因启动子区域甲基化位点分析;

3) CpG岛区域甲基化水平差异分析。