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项目 | 甲基化相关检测 |
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服务内容 | DNA甲基化水平检测 |
服务周期 | 25-35工作日 |
详情 | DNA甲基化水平检测 原理: DNA甲基化是表观遗传学的重要研究内容之一,它可以抑制基因的表达。甲基化通常发生在胞嘧啶的C5位,形成5-甲基胞嘧啶(5mC),甲基化的胞嘧啶多位于CpG岛上。甲基化特异性PCR (MSP)是一种检测基因组DNA甲基化水平的常用方法。该法是将DNA经亚硫酸氢钠处理,非甲基化的胞嘧啶转变为尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶保持不变。在PCR反应时,设计两套不同的引物对:一对引物序列针对经亚硫酸氢钠处理后的甲基化DNA链设计,若用该对引物能扩增出片段,说明该检测位点发生了甲基化;另一引物针对经亚硫酸氢钠处理后的非甲基化DNA链设计,若用该对引物能扩增出片段,说明该检测位点没有甲基化。两对引物都具有很高的特异性,与未经处理的DNA序列无互补配对。
实验流程: 1. 序列分析及MSP引物设计; 2. 基因组DNA抽提及体外甲基化处理; 3. MSP; 4. MSP产物测序。
相关要求(客户提供): 1. 客户提供待测基因准确信息序列或NCBI序列链接; 2. 客户提供甲基化修饰试剂盒。
最终结果: 1. MSP产物电泳图; 2. 具体实验流程(包括:实验步骤;主要仪器及试剂说明(含仪器厂家、型号;试剂厂家、批号)); 3. 相关结果分析: 1) 甲基化分析,筛选差异甲基化位点; 2) 基因启动子区域甲基化位点分析; 3) CpG岛区域甲基化水平差异分析。
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